2013年執(zhí)業(yè)藥師中藥化學(xué)輔導(dǎo)：結(jié)構(gòu)測(cè)定

　　中藥化學(xué)成分特別是有效成分的結(jié)構(gòu)鑒定(測(cè)定)是中藥成分研究的重要步驟。如果不能鑒定結(jié)構(gòu)，說(shuō)明研究中藥化學(xué)成分沒有結(jié)果，更談不上更進(jìn)一步的研究，如藥代動(dòng)力學(xué)研究、結(jié)構(gòu)改造等。

　　中藥化學(xué)成分鑒定的方法

　　要進(jìn)行中藥化學(xué)成分結(jié)構(gòu)鑒定，首先要保證樣品的純度，如果被測(cè)樣品達(dá)不到一定純度，則無(wú)法鑒定結(jié)構(gòu)式。鑒定結(jié)構(gòu)式采用的方法有化學(xué)法(利用化學(xué)反應(yīng)等)、波譜法等。波譜法是非常準(zhǔn)確的先進(jìn)方法，包括紫外光譜(UV)、紅外光譜(IR)、核磁共振法(H-NMR、C-NMR)、質(zhì)譜法(MS)等。

　　如果被測(cè)成分是已知化合物，在確定純度后，不必作很多鑒定工作，選擇其中幾種即可。如果能得到已知物的標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌罚瑢⒈粶y(cè)定成分和標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行色譜分析(TLC或HPLC)，Rf值或保留時(shí)間一致，混熔點(diǎn)不下降，紅外光譜完全一致，分子量一致，就可說(shuō)明被測(cè)成分和對(duì)照品一致。如果得不到標(biāo)準(zhǔn)品，則和文獻(xiàn)中已知物的紅外光譜(最好是已知物圖譜)、質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)照，有時(shí)還需和已知物的NMR譜數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)照，如果一致則說(shuō)明被測(cè)成分和文獻(xiàn)報(bào)道成分一致。

　　如果被測(cè)成分為未知物，則要作很多工作。對(duì)未知成分的結(jié)構(gòu)測(cè)定，也要注意文獻(xiàn)工作，注意該中藥的來(lái)源，注意同種屬植物中化學(xué)成分的研究情況，收集信息，對(duì)結(jié)構(gòu)鑒定很有益處。未知物的鑒定基本有二種情況，一種是全新結(jié)構(gòu)的化合物，一種是基本骨架已知，而只是取代基種類不同或位置不同，對(duì)后一種情況，收集文獻(xiàn)資料對(duì)鑒定結(jié)構(gòu)非常有用。

　　中藥化學(xué)成分的鑒定程序

　　對(duì)一個(gè)化合物，一般按下列步驟進(jìn)行鑒定：

　　純度的確定

　　(1)首先觀察外形、顏色是否單一純正，晶形是否一致。

　　(2)色譜分析：薄層色譜結(jié)果為單一斑點(diǎn)，應(yīng)注意點(diǎn)樣量不可太小，展開劑不可只選一種。有時(shí)可用氣相色譜和高效液相色譜法，結(jié)果為單一色譜峰。

　　(3)熔點(diǎn)測(cè)定：熔點(diǎn)距一般應(yīng)小于2℃。

　　物理常數(shù)的測(cè)定

　　物理常數(shù)固體樣品包括熔點(diǎn)、比旋度等;液體樣品包括沸點(diǎn)、折光率、比旋度等。

　　分子式測(cè)定

　　采用高分辨質(zhì)譜法得到分子離子峰，可直接得出分子式。如無(wú)高分辨質(zhì)譜則可先測(cè)出分子量(一般用質(zhì)譜)，再進(jìn)行元素分析測(cè)出所含元素及百分含量，求出實(shí)驗(yàn)式，最后計(jì)算出分子式，實(shí)驗(yàn)值與理論值應(yīng)非常接近。

　　化合物功能團(tuán)和分子骨架的推定

　　采用的方法有計(jì)算不飽和度、化學(xué)反應(yīng)、IR光譜、UV光譜、NMR譜、MS數(shù)據(jù)，綜合分析，有時(shí)與已知物進(jìn)行比較，以確定被測(cè)樣品的基本骨架與功能團(tuán)(取代基)。

　　化學(xué)結(jié)構(gòu)的確定

　　通過(guò)綜合分析所有波譜數(shù)據(jù)，必要時(shí)要作一些特殊的測(cè)試，如NMR中的一些新方法，甚至作Ⅹ射線衍射等測(cè)試，確定化學(xué)結(jié)構(gòu)式。如果有可能，進(jìn)行人工合成，將從中藥中提取分離所得樣品與人工合成品進(jìn)行全面比較來(lái)證明結(jié)構(gòu)式的正確性。