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2015年中醫(yī)助理醫(yī)師《實踐技能》復(fù)習(xí)講義(7)

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淀粉酶測定

　　(1)碘-淀粉比色法測定：B血清(或血漿)中a-淀粉酶(a-AMY)催化淀粉分子中α-1，4糖苷鍵水解，產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖及含有α-1，6糖苷支鏈的糊精。在底物過量的條件下，反應(yīng)后加入碘液與未被水解的淀粉結(jié)合成藍(lán)色復(fù)合物，其藍(lán)色的深淺與空白管比較、從而推算出淀粉酶的活性單位。

　　(2)對-硝基苯麥芽七糖苷法：以對-硝基苯麥芽七糖苷為底物，經(jīng)α-淀粉酶催化，水解為游離的寡糖(G5、G4、G3)及葡萄糖單位減少的對一硝基苯寡糖苷(4NP-G2、4NP-G3、4NP-G2);4NP-G2、4NP-G3及一部分4NP-G4，受α-葡萄糖苷酶催化，水解為對一硝基酚和葡萄糖。對一硝基酚的生成量，在一定范圍內(nèi)與R-淀粉酶活力成正比;但其摩爾數(shù)僅為酶解底物(4NP-G7)的三分之一，還有三分之二結(jié)合在4NP-G4中。

　　PNP(對-硝基苯酚)的生成引起405nm處吸光度的上升，上升速率與AMY的活力成正比。

　　(3)2-氯-4-硝基苯麥芽三糖苷法

　　CNP(2-氯-4-硝基苯酚)的生成引起405nm處吸光度的上升，上升速率與AMY的活力成正比。

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