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平板劃線分離法簡(jiǎn)介
平板劃線分離法是接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面通過分區(qū)劃線而達(dá)到分離微生物的一種方法。其原理是將微生物樣品在固體培養(yǎng)基表面多次作“由點(diǎn)到線”稀釋而達(dá)到分離目的。
(1)倒平板溶化牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基倒平板,水平靜置待凝。
(2)在酒精燈光焰上灼燒接種環(huán),待冷,取一接種環(huán)金黃葡萄球菌、大腸桿菌混合菌液。
(3)左手握瓊脂平板稍抬起皿蓋,同時(shí)靠近火焰周圍,右手持接種環(huán)伸入皿內(nèi),在平板上一個(gè)區(qū)域作之形回劃線,劃線時(shí)例接種環(huán)與平板表面成30-40°角度輕輕接觸,以腕力在表面作輕快的滑動(dòng),勿使平板表面劃破或嵌進(jìn)增基內(nèi)。
(4)灼燒接種杯,以殺滅接種環(huán)上尚殘余的菌液,待冷卻后,再將接種環(huán)伸入皿內(nèi),在第一區(qū)域劃過線的地方稍接觸一下后,轉(zhuǎn)動(dòng)90°,在第二區(qū)域繼續(xù)劃線。
(5)劃畢后再灼燒接種杯,冷卻后用同樣方法在其他區(qū)域劃線。
(6)全部劃線完畢后,在平皿底用特種蠟筆注明菌種、日期、組別、姓名。將整個(gè)培養(yǎng)皿倒置放入恒溫培養(yǎng)箱。
(7)37℃經(jīng)過24-48小時(shí)培養(yǎng)后取出觀察。注意菌落的開關(guān)、大小、顏色、邊緣、表面結(jié)構(gòu)、透明度等性狀。
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