(一)基本原理
速率散射比濁分析是一種動(dòng)力學(xué)測(cè)定方法,在一定條件下,抗原和相應(yīng)的抗體很快結(jié)合成抗原抗體免疫復(fù)合物顆粒,速率比濁法就是在一定時(shí)間內(nèi)抗原抗體結(jié)合過程中,測(cè)定二者結(jié)合的最大反應(yīng)速度,即反應(yīng)達(dá)頂峰峰值。所謂速率是抗原抗體結(jié)合反應(yīng)過程中,在單位時(shí)間內(nèi)兩者結(jié)合的速度。速率法是測(cè)定最大反應(yīng)速率,即在抗原抗體反應(yīng)達(dá)最高峰時(shí),通常為數(shù)十秒鐘,測(cè)定其復(fù)合物形成的量。峰值的高低在抗體過量情況下與抗原的量成正比。峰值出現(xiàn)的時(shí)間與抗體的濃度及其親和力直接相關(guān)。不同抗原含量其速率峰值不同,通過微電腦處理,求出抗原含量。
(二)抗原過量檢測(cè)
附:終點(diǎn)散射比濁法
其原理是讓抗原抗體作用一定時(shí)間,使其反應(yīng)達(dá)到平衡后,測(cè)定其復(fù)合物的量。復(fù)合物的濁度不再受時(shí)間的影響,但反應(yīng)復(fù)合物聚合產(chǎn)生絮狀沉淀之前(大約反應(yīng)數(shù)十分鐘)進(jìn)行濁度測(cè)定。敏感度達(dá)mg/L水平,可自動(dòng)化,但反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng)。
免疫膠乳比濁法
原理:選擇一種大小適中,均勻一致的膠乳顆粒,吸附抗體后,當(dāng)遇到相應(yīng)抗原時(shí),則發(fā)生凝集,單個(gè)膠乳顆粒在入射光波長(zhǎng)之內(nèi),光線可透過,當(dāng)兩個(gè)膠乳凝集時(shí),則使透過光減少。這種減少的程度與膠乳凝集成正比,與抗原量成正比。該法敏感度高,試劑穩(wěn)定,因反應(yīng)液中無PEC沉淀劑的影響,個(gè)體IC對(duì)結(jié)果影響也小,所以結(jié)果穩(wěn)定、可靠,特異性好;不需特殊儀器設(shè)備,一般分光光度計(jì)、自動(dòng)化生化分析儀或散射比濁儀均可使用。
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