2010執(zhí)業(yè)藥師考試藥學(xué)專業(yè)知識(shí)(一)復(fù)習(xí)要點(diǎn)(12)

　　三、液固吸附色譜法 LSC

　　l 分離原理：按被分離組分的分子(溶質(zhì)分子)與流動(dòng)相分子(溶劑分子)爭(zhēng)奪吸附劑表面活性中心的吸附能力的差別而分離。

　　l 硅膠為吸附色譜法最常用的固定相。

　　四、液液分配色譜法 LLC

　　(一)正相分配色譜法：流動(dòng)相極性<固定相極性。

　　主要用于分離溶于有機(jī)溶劑的極性及中等極性的分子型物質(zhì)。

　　反相分配色譜法：流動(dòng)相極性>固定相極性。主要用于分離非極性至中等極性物質(zhì)。

　　(二)LLC的固定相 最常用的固定相是化學(xué)健合相。

　　(1)非極性健合相：十八烷基硅烷健合硅膠(ODS，C18)、辛基硅烷健合硅膠(C8)，在反相HPLC中最為常用。

　　(2)極性健合相：常用氨基和氰基硅烷鍵合相，即可用于正相色譜法，也可用于反相色譜法。多用于正相HPLC。

　　★★五、色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

　　目的：檢查色譜系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)條件影響下是否符合要求

　　在各品種項(xiàng)下規(guī)定的色譜條件下，除固定相種類、流動(dòng)相組成、檢測(cè)器類型不得改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑、色譜柱長(zhǎng)度、固定相牌號(hào)、載體粒度、流動(dòng)相流速、混合流動(dòng)相各組成的比例、柱溫、進(jìn)樣量、檢測(cè)器的靈敏度等，均可適當(dāng)改變。以適應(yīng)具體的色譜系統(tǒng)并達(dá)到色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的要求。

　　一、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

　　色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)通常包括：理論踏板數(shù)、分離度、重復(fù)性和拖尾因子等四個(gè)指標(biāo)。

　　(1)色譜柱的理論踏板數(shù)(n) n=5.54 (tR /Wh/2)2 tR， Wh/2統(tǒng)一單位

　　如測(cè)得n低于規(guī)定，應(yīng)改變柱長(zhǎng)或載體性能、重填色譜柱等以求達(dá)到。

　　(2)分離度 (R) R=2(tR2-tR1)/(W1+W2) 定量分析時(shí)R ³ 1.5

　　記錄紙速：轉(zhuǎn)換分子、分母單位相同的參數(shù)。

　　考題 A型題：

　　測(cè)得兩色譜峰的保留時(shí)間tR1=6.5min，tR2=8.3min，峰寬W1=1.0min，W2=1.4min，則兩峰分離度R為

　　A、0.22

　　B、1.2

　　C、2.5

　　D、0.75

　　ÖE、1.5

　　(3)重復(fù)性：

　　①對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，其峰面積測(cè)量值的 RSD ≤2.0%

　�、谂渲葡喈�(dāng)于80%、100%和120%的對(duì)照品溶液，加規(guī)定量的內(nèi)標(biāo)溶液，配成三種不同濃度的溶液，分別至少進(jìn)樣2次，計(jì)算平均校正因子，其RSD ≤2.0%

　　(4)拖尾因子(T)： T = W0.05h/2d1 T應(yīng)在0.95 ~ 1.05之間