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火箭電泳試驗(yàn)方法
1.抗體瓊脂板的制備同單向擴(kuò)散法,但注意稀釋液應(yīng)用pH8.6離子強(qiáng)度0.05M的巴比妥緩沖液。
2.打孔。
3.將用緩沖液稀釋的適宜濃度的參考血清及適當(dāng)稀釋的抗原(人血清)分別加入各孔中,每孔10或20微升,要求加量準(zhǔn)確而不外溢。
4.把加完樣的免疫瓊脂板放入電泳槽中進(jìn)行電泳,電壓4~6伏/厘米,電泳時(shí)間1~5小時(shí),直到大部分抗原孔前端出現(xiàn)頂端尖窄而完全閉合的火箭狀沉淀線,關(guān)閉電源。
5.取下瓊脂板,以抗原孔中心為起點(diǎn),量出各火箭狀沉淀線的高。
血清酶分類
雖然絕大多數(shù)血清酶含量極低,在血液中沒有任何功能,但也確有一小部分酶在細(xì)胞內(nèi)合成后分泌到血液中,并行使一定功能。其典型例子就是一些與凝血過程有關(guān)的酶,如凝血酶原、Ⅹ因子、Ⅻ因子等,還有與纖溶有關(guān)的酶如纖溶酶原、纖溶酶原活化因子等。它們一般以失活或酶原狀態(tài)分泌入血,在一定情況下被活化,引起一系列病理或生理變化。它們?cè)谘袧舛韧芨,甚至超過大多數(shù)器官細(xì)胞內(nèi)濃度,因此在血中的變化常不是升高而是下降。它們大都在肝臟合成,并以恒定速度釋放入血,肝實(shí)質(zhì)病變時(shí),血中濃度明顯下降,常作為肝功能試驗(yàn)的一部分。這類對(duì)臨床有價(jià)值的酶還有膽堿酯酶(CHE)、銅氧化酶、脂蛋白脂酶等,在血中含量都以mg%計(jì),人們將此類酶命名為血漿特異酶。
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